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5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
A117363
5-HIAA ELISA Kit
通用種屬
血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物學(xué)樣本
1.5625ng/mL
3.125ng/mL-100ng/mL
貨號(hào) 純度 規(guī)格 目錄價(jià) 會(huì)員價(jià) 庫(kù)存 數(shù)量 購(gòu)買
A117363-96T 96T 96T ¥2200.00 登錄查看
A117363-48T 48T 48T ¥1500.00 登錄查看
產(chǎn)品詳情


實(shí)驗(yàn)原理: 

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)5-羥基吲哚乙酸5-HIAA。預(yù)先包被5-HIAA特異性捕獲抗體的微孔板與樣本中的5-HIAA結(jié)合,再加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物,最后通過辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的親和素催化TMB顯色,顏色深淺與樣本中5-HIAA濃度成正比。

結(jié)果的計(jì)算:
計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品和樣本復(fù)孔的平均OD值并減去空白孔的OD值作為校正值。以濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出四參數(shù)邏輯函數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(作圖時(shí)去掉空白組的值)或者使用能夠生成四參數(shù)邏輯(4-P)曲線擬合的計(jì)算機(jī)軟件來創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè)并在計(jì)算樣本濃度時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

典型數(shù)據(jù)及參考曲線:
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) 100.00 50.00 25.00 12.50 6.25 3.13 1.56 0.00
OD450/630值 2.681 1.564 0.814 0.494 0.307 0.158 0.093 0.026
校正OD值 2.656 1.539 0.788 0.468 0.281 0.132 0.067 0.000

本圖所示標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供示例,結(jié)果計(jì)算應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線為準(zhǔn)計(jì)算樣本結(jié)果 

靈敏度:
經(jīng)樣本測(cè)試,本試劑盒的檢測(cè)靈敏度為1.5625ng/mL  
特異性:
可檢測(cè)樣本中的 5-HIAA,且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)
檢測(cè)范圍:
本試劑盒的檢測(cè)范圍為:3.125ng/mL-100ng/mL
樣本檢測(cè):
血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物學(xué)樣本


樣本處理:
1. 血清樣本
室溫靜置2小時(shí)或4℃過夜后,1000×g離心20分鐘
取上清,-20℃或-80℃保存(避免反復(fù)凍融)
2. 血漿樣本
用EDTA或肝素抗凝,采集后30分鐘內(nèi)2-8℃ 1000×g離心15分鐘
取上清,保存條件同血清
3. 組織勻漿
用預(yù)冷PBS沖洗組織,按1:9重量體積比加入PBS(含蛋白酶抑制劑)
冰上勻漿后離心取上清
4. 細(xì)胞裂解液
推薦使用非變性裂解緩沖液(避免化學(xué)裂解液干擾)

檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的局限性:
本試劑盒僅供科研使用,不能用于臨床診斷或治療。
1. 試劑盒的使用期限不得超過試劑盒標(biāo)簽上的有效期。不要將試劑與其他批次或來源的試劑混合使用或替換使用。
2. 如果樣品產(chǎn)生的值高于最高標(biāo)準(zhǔn),則用測(cè)定稀釋劑進(jìn)一步稀釋樣品,并重復(fù)測(cè)定。稀釋劑、實(shí)驗(yàn)員、移液技術(shù)、洗滌技術(shù)、培養(yǎng)時(shí)間或溫度以及試劑盒使用年限的任何變化都可能導(dǎo)致結(jié)果變化。
3. 樣本采集、處理和存儲(chǔ)的變化可能會(huì)導(dǎo)致樣本值的差異。
4. 本試劑盒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)消除了不同生物樣品中可能潛在的干擾因素的影響,但并不能涵蓋所有潛在影響因素。不能排除存在其他干擾的可能性。

操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng):
1. 混合蛋白質(zhì)溶液時(shí),應(yīng)始終避免起泡。為了避免交叉污染,在添加每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和試劑時(shí)應(yīng)更換移液器槍頭。此外,每種試劑應(yīng)單獨(dú)使用容器。
2. 確保試劑不間斷地添加到板孔中。為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果,在孵育步驟中需要粘合好封板膜。
3. 當(dāng)使用自動(dòng)洗板機(jī)時(shí),在加入洗滌緩沖液后加入30秒的浸泡期,或者在洗滌步驟之間將板旋轉(zhuǎn)180度,可以提高測(cè)定精度。
4. 顯色劑應(yīng)保持無色,直到添加到板中。確保顯色劑不受光線照射。顯色劑應(yīng)從無色變?yōu)樗{(lán)色。
5. 應(yīng)按照與顯色劑相同的順序?qū)⒔K止液添加到板中。加入終止液后,孔中形成的顏色將從藍(lán)色變?yōu)辄S色。綠色的孔表示終止液未與基質(zhì)溶液充分混合。
6. 此試劑盒提供的終止液為稀硫酸溶液,具有一定腐蝕性,應(yīng)謹(jǐn)慎操作。
7. 該試劑盒中的某些成分含有防腐劑,可能會(huì)引起皮膚過敏反應(yīng),應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。
8. 顯色劑B可能會(huì)引起皮膚、眼睛和呼吸道刺激,應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。
9. 佩戴防護(hù)手套、防護(hù)服、眼睛和面部防護(hù)用品。處理后徹底洗手。

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